Nie zaobserwowaliśmy odrzucenia linii komórkowych PG ES homozygotycznych pod względem haplotypu 129S1 H-2 (H-2bc) u hybrydowych biorców heterozygotycznych pod względem hiperzastów 129SvEv (H-2bc) i C57BL / 6 (H-2b). Haplotypy H-2b i H-2bc uważa się za identyczne w regionie klasycznym, ale różnią się regionem T, co może prowadzić do choroby przeszczep przeciwko gospodarzowi. Figura 2 Wytworzenie in vitro hematopoetycznych pochodnych autologicznych komórek PG ES w myszach Hbbth-4 / Hbb + koryguje fenotyp rbc. (A) Wkład pochodnych komórek PG ES do obwodowego wbc po przeszczepie (tp) do heterozygotycznych heteroblastów Hbbth-4 (het; żółte linie) i biorców z miotu WT (niebieskie linie). Trzech biorców wykazywało stabilne, długotrwałe wszczepienie. (B) Krwawe rozmazy WT i myszy heterozygotycznych przed i 4 tygodnie po transplantacji pochodnych komórek PG ES. Oryginalne powiększenie, × 40. (C) Wykresy rozproszenia do przodu / z boku rbc (czerwone) od myszy WT i het przed i 115 dni po transplantacji (strzałka uwydatnia komórki poza bramką określoną przez właściwości WT rbc). Żaden z biorców nie wykazywał żadnej patologii ani tworzenia nowotworów związanych z przeszczepami. Pochodne komórek ES były obecne w linii erytroidalnej (Ter119-dodatnia, Suplementowa Figura 3A), z niewielkim udziałem w komórkach limfoidalnych (dane nie pokazane), zgodnie z obserwacjami z pluripotencjalnymi przeszczepami krwiotwórczymi z komórek macierzystych (3, 4, 23, 25). ). Analiza odmian specyficznych dla szczepu mysiego – izomeraza glukozowo-fosforanowa w całkowitej krwi obwodowej (99% erytrocytów) ujawniła wysokie poziomy zastąpienia rbc pochodnymi komórek ES. W kilku biorcach o umiarkowanym udziale pochodnych komórek ES w wbc, rbc pochodziły głównie z komórek ES (Suplementowa Figura 3B), co sugeruje selektywną wymianę erytroidalną pochodzącego od dawcy. Przeszczepy in vitro hematopoetycznych pochodnych komórek ES w mysich modelach zazwyczaj dają mieszany chimeryzm (3, 23, 25), jak widać tutaj; jednak ze względu na domniemaną selektywną przewagę normalnych komórek może to wystarczyć do odwrócenia fenotypów talasemizowanych (26, 27). Hetbiozygoty Hbbth-4 z przeszczepieniem uzyskanym z komórek ES wykazywały normalną morfologię rbc (Figura 2B). W porównaniu z populacją rbc normalnych myszy z wyraźną charakterystyką rozproszenia przedniego i bocznego wizualizowaną przez sortowanie komórek aktywowane fluorescencyjnie (FACS), rbc z heterozygot Hbbth-4 charakteryzuje się znacznie szerszym rozkładem wielkości, widocznym w szerszym rozkładzie w rozpraszaniu do przodu (Figura 2C). Hbbs-4 heterozygotyczni biorcy z przeszczepionymi pochodnymi hematopoetycznymi PG ES wykazywali korektę rozkładu wielkości rbc podobnego do tego u normalnych myszy (Figura 2C). Ocena parametrów hematologicznych wykazała poprawę parametrów, które były nieprawidłowe w heterozygotach Hbbth-4, w tym niski hematokryt, niski poziom rbc i niski średni hemoglobiny
[hasła pokrewne: jak dobrze dobrać stanik, olej kokosowy rafinowany czy nierafinowany, ludzie którzy przeżyli śmierć kliniczną ]
[przypisy: olej z wiesiołka na twarz, szpital bonifratrów w łodzi, olej kokosowy rafinowany czy nierafinowany ]
