Nie zaobserwowaliÅ›my odrzucenia linii komórkowych PG ES homozygotycznych pod wzglÄ™dem haplotypu 129S1 H-2 (H-2bc) u hybrydowych biorców heterozygotycznych pod wzglÄ™dem hiperzastów 129SvEv (H-2bc) i C57BL / 6 (H-2b). Haplotypy H-2b i H-2bc uważa siÄ™ za identyczne w regionie klasycznym, ale różniÄ… siÄ™ regionem T, co może prowadzić do choroby przeszczep przeciwko gospodarzowi. Figura 2 Wytworzenie in vitro hematopoetycznych pochodnych autologicznych komórek PG ES w myszach Hbbth-4 / Hbb + koryguje fenotyp rbc. (A) WkÅ‚ad pochodnych komórek PG ES do obwodowego wbc po przeszczepie (tp) do heterozygotycznych heteroblastów Hbbth-4 (het; żółte linie) i biorców z miotu WT (niebieskie linie). Trzech biorców wykazywaÅ‚o stabilne, dÅ‚ugotrwaÅ‚e wszczepienie. (B) Krwawe rozmazy WT i myszy heterozygotycznych przed i 4 tygodnie po transplantacji pochodnych komórek PG ES. Oryginalne powiÄ™kszenie, × 40. (C) Wykresy rozproszenia do przodu / z boku rbc (czerwone) od myszy WT i het przed i 115 dni po transplantacji (strzaÅ‚ka uwydatnia komórki poza bramkÄ… okreÅ›lonÄ… przez wÅ‚aÅ›ciwoÅ›ci WT rbc). Å»aden z biorców nie wykazywaÅ‚ żadnej patologii ani tworzenia nowotworów zwiÄ…zanych z przeszczepami. Pochodne komórek ES byÅ‚y obecne w linii erytroidalnej (Ter119-dodatnia, Suplementowa Figura 3A), z niewielkim udziaÅ‚em w komórkach limfoidalnych (dane nie pokazane), zgodnie z obserwacjami z pluripotencjalnymi przeszczepami krwiotwórczymi z komórek macierzystych (3, 4, 23, 25). ). Analiza odmian specyficznych dla szczepu mysiego – izomeraza glukozowo-fosforanowa w caÅ‚kowitej krwi obwodowej (99% erytrocytów) ujawniÅ‚a wysokie poziomy zastÄ…pienia rbc pochodnymi komórek ES. W kilku biorcach o umiarkowanym udziale pochodnych komórek ES w wbc, rbc pochodziÅ‚y głównie z komórek ES (Suplementowa Figura 3B), co sugeruje selektywnÄ… wymianÄ™ erytroidalnÄ… pochodzÄ…cego od dawcy. Przeszczepy in vitro hematopoetycznych pochodnych komórek ES w mysich modelach zazwyczaj dajÄ… mieszany chimeryzm (3, 23, 25), jak widać tutaj; jednak ze wzglÄ™du na domniemanÄ… selektywnÄ… przewagÄ™ normalnych komórek może to wystarczyć do odwrócenia fenotypów talasemizowanych (26, 27). Hetbiozygoty Hbbth-4 z przeszczepieniem uzyskanym z komórek ES wykazywaÅ‚y normalnÄ… morfologiÄ™ rbc (Figura 2B). W porównaniu z populacjÄ… rbc normalnych myszy z wyraźnÄ… charakterystykÄ… rozproszenia przedniego i bocznego wizualizowanÄ… przez sortowanie komórek aktywowane fluorescencyjnie (FACS), rbc z heterozygot Hbbth-4 charakteryzuje siÄ™ znacznie szerszym rozkÅ‚adem wielkoÅ›ci, widocznym w szerszym rozkÅ‚adzie w rozpraszaniu do przodu (Figura 2C). Hbbs-4 heterozygotyczni biorcy z przeszczepionymi pochodnymi hematopoetycznymi PG ES wykazywali korektÄ™ rozkÅ‚adu wielkoÅ›ci rbc podobnego do tego u normalnych myszy (Figura 2C). Ocena parametrów hematologicznych wykazaÅ‚a poprawÄ™ parametrów, które byÅ‚y nieprawidÅ‚owe w heterozygotach Hbbth-4, w tym niski hematokryt, niski poziom rbc i niski Å›redni hemoglobiny
[hasła pokrewne: jak dobrze dobrać stanik, olej kokosowy rafinowany czy nierafinowany, ludzie którzy przeżyli śmierć kliniczną ]
[przypisy: olej z wiesiołka na twarz, szpital bonifratrów w łodzi, olej kokosowy rafinowany czy nierafinowany ]
